AO染色液(1mg/ml)

保存條件 4℃避光保存，有效期12個月。

產(chǎn)品簡介：

Acridine Orange （吖啶橙,） 屬于三環(huán)雜芳香燃料，可以標記DNA、RNA，屬于異染性熒光染料。吖啶橙激發(fā)濾光片波長488nm。阻斷濾光片波長515nm。吖啶橙與細胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別，可發(fā)出不同顏色的熒光（即著色特異性）。該染料具有膜通透性，能透過細胞膜，使核DNA和RNA染色。因此AO常用于細胞內(nèi)DNA和RNA進行檢測。AO與核酸結(jié)合方式主要有：1、插入性結(jié)合，AO嵌入核酸雙鏈的堿基對之間，這種結(jié)合方式主要為AO與DNA的結(jié)合，其熒光發(fā)射峰為530nm，激發(fā)后呈綠色熒光；2、靜電吸引，帶正電荷的AO與單鏈核酸的磷酸根（帶負電荷）產(chǎn)生靜電間的吸引結(jié)合，這種結(jié)合方式主要為AO與RNA的結(jié)合，其熒光發(fā)射峰為640nm，激發(fā)后呈紅色熒光，少量結(jié)合會呈桔黃色或桔紅色熒光。因此，吖啶橙嵌合到雙鏈DNA分子中顯綠色，與DNA單鏈或RNA結(jié)合時發(fā)桔黃色或橙紅色熒光。

AO染色液（1mg/ml）為儲存液，使用時應(yīng)稀釋到合適濃度后使用。AO染色常與EB染色合用雙染，因EB只染死細胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光，由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。AO染色液工作濃度為8.5ug/ml。

使用說明：

1.  收集細胞（采用流式細胞儀檢測時，應(yīng)先固定細胞），用 PBS 清洗細胞 1 次，計數(shù)并調(diào)節(jié)細胞濃度至 10

⁶/ml。

2.  取適量的細胞懸液，加入 AcridineOrangeStain（1mg/ml），使 AO 終濃度為 8.5-10μg/ml，輕輕混勻。

3.  室溫避光染色 15-20min，滴加于載玻片上并加蓋玻片或上流式細胞儀分析。

4.  熒光顯微鏡下觀察（激發(fā)濾光片波長488nm，阻斷濾光片波長515nm），計數(shù)并拍照。

注意事項：

1.  Acridine OrangeStain （1mg/ml） 不含破膜劑，較少單獨使用。

2.  吖啶橙染色常與 EB 染色合用，可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。

3.  如有低溫離心機進行離心效果更佳。

4.  操作過程中應(yīng)注意減少試劑暴露于強光下的時間。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液（C02-04003）。

5.  為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。